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楼主  发表于: 2017-08-25 17:42

 基因重排克隆分析:诊断淋巴瘤的重要辅助检查

近年来,淋巴瘤的发病率呈现明显上升趋势,是我国增长最快的恶性肿瘤之一。由于淋巴瘤恶性程度高,发展快、发现晚,预后极差,因此早期的诊断对提高患者的生存率及生活质量显得特别重要。随着分子遗传学的发展,越来越多的方法被应用到淋巴瘤的诊断中,其中基因重排克隆性分析已经广泛应用于淋巴组织增生与淋巴瘤的鉴别诊断中,而且在多数三甲医院病理科已经成为常规检测项目辅助诊断淋巴瘤。

    在良性淋巴组织增生性病变中,淋巴细胞起源于多个克隆,都有他们独特的基因重排形式,所以PCR扩增产物片段大小不一,序列也不同,电泳表现为不同DNA长度的抹带或呈现弥漫性现象。而淋巴瘤具有克隆性特征,子代瘤细胞都是从同一恶变的细胞演化而来,具有相同的基因编*****,所以PCR产物电泳表现为一条或几条清晰条带。因此通过检测淋巴组织中一些基因重排为克隆性还是非克隆性,可以鉴别组织中淋巴细胞是克隆性增生的瘤细胞还是非克隆性反应性增生的淋巴细胞,这对淋巴瘤的诊断具有重要意义。

    基因重排克隆分析可以应用于扁桃体、腺样体、淋巴结等淋巴组织增生性病变及全身各个系统发生的淋巴瘤病例。检测标本为石蜡包埋组织,经石蜡切片加切蜡卷进行DNA的提取,随后对之使用商品化的BIOMED-2进行PCR多个引物的扩增,引物包括:B细胞受体相关的IgH/IgL等,T细胞受体相关的:TCR,扩增产物进行电泳分析。克隆分析适用于:形态不典型、缺乏特异性标记;形态上符合淋巴瘤,但部分少见和年龄不相符的病例;淋巴瘤谱系的分类,确定是B细胞来源的还是T细胞来源的。克隆分析结果显示克隆性,并不代表都是肿瘤,一些良性病变也可以克隆增生,一般淋巴瘤的阳性率约80%。

    基因重排克隆性分析对于淋巴组织非典型增生及形态学、免疫组化染色结果不典型的淋巴瘤病例帮助很大,其结果同时一定程度预示了病变的转归,因此基因重排克隆分析是诊断淋巴瘤的一项重要辅助检查。
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