检测细胞活性、凋亡、毒性方面有着各式各样的试剂和方法。而大都有预见性地肯定道CCK-8法是目前最具潜力和优势的细胞活性毒性检测方法。那为什么较早期传统的MTT法,CCK-8此被科研和药厂等相关实验人员看好呢?
不可否认,曾经MTT法的出现使各实验人员为之振奋。因为MTT法较当时其他细胞活性检测有不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测等优势,随即MTT势不可挡地成为细胞活性检测的主流方法。需知,长江后浪推前浪,辩证地讲,没有什么会亘古不变。而目前CCK-8就以后浪的角色逐渐活跃在生物细胞检测的舞台上,它的一出现就极大地受到我们实验人员的青睐。
相比MTT法和CCK-8法,原理是相同的,都是先用试剂将细胞内的脱氢酶还原成甲臜,通过甲臜数量的检测就可以反映细胞的活性。这两者主要的不同就在于MTT法甲臜产物不溶于水,检测它必须先用有机溶剂溶解,而CCK-8法甲臜产物是水溶性的。这能明显看出CCK-8的优势,姑且不讲溶解甲臜的有机溶剂对实验人员有怎样的毒性,光是实验操作步骤、周期、便捷等就有巨大优势,能效地减少实验过程的污染,增强实验结果的说服力。更何况MTT法操作对细胞的毒性是不能忽略的,而CCK-8法对细胞基本无毒性。
CCK-8试剂盒知名度最高的就是日本同仁的。着眼于国内研发,也有一些新起之秀。例如上海七海复泰生物的CCK-8分为三种型:标准、增强、低毒。标准型对比日本同仁的研发推出,质量基本一致;而增强型针对需要快速显色的细胞,并且其OD值强于同仁产品;低毒型针对对外来化合物敏感的细胞,在加入同等试剂后,10小时内对细胞生长活性无影响。另外像碧云天的CCK-8试剂盒也在国内有一定的知名度。