从1665年Robert Hooke用140倍的光学显微镜发现细胞至今,人类对于细胞的研究日趋细化深入。
目前检测细胞凋亡、活性、毒性等都是较常规的实验。其中,细胞凋亡检测由一开始的PI单染法优化到Annexin V/PI法(ITC/PI或者EGFP/PI双染法)。
方法 PI TUNEL Annexin V/PI
凋亡检出率 27.19% 50.17% 32.28%
凋亡+死亡检出率 27.19% 50.17% 50.17%
区分细胞 凋亡细胞+死亡细胞 凋亡细胞+死亡细胞 正常细胞、凋亡细胞、死亡细胞
固定细胞 需要 需要 不需要
特异性 低 低 高
漏检率 42.8% 低 低
错检率 21.3% 稍高 低
Annexin V/PI法既可检测早期凋亡,又可将凋亡及死亡细胞区分开来,较PI、TUNEL具有更高的灵敏性及特异性。且不需固定,省时省力,应是目前流式细胞仪定量检测凋亡的首选方法,也成为国内实验室的主流方法。