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果汁abc 2021-05-06 09:34

近年来,随着我国经济的高速发展及工业化进程的加快,土壤重金属污染的程度也不断加剧。据2014年的《全国土壤污染状况调查公报》报道,受Cd、Pb、Hg、Cr、Zn、Ni、As、Cu等重金属污染的土壤占19.4%,其中,受Cd、As、Pb等重金属污染的耕地面积达2×105km2,约占耕地总面积的1/5。

目前,对土壤重金属污染修复的研究大多集中在草本植物方面,而对木本植物少有涉及。因此,在汉斯出版社《农业科学》期刊中,有学者研究从乡土树种对土壤重金属的耐受性、吸收能力及根际土壤微生物多样性角度考虑,利用lltmina高通量测序技术,从细菌多样性及其与土壤化学性质的相互关系等方面,比较分析矿区与非矿区乡土树种根际土壤细菌对重金属的响应程度,以期在今后的实际运用中,分别发挥植物、微生物修复的优点,构建利用乡土树种根际土壤微生物协同处理矿区或其他重金属异常区土壤重金属污染的技术方法。

实验样品采样点主要选择在河池市境内的选矿厂、冶炼厂、矿物运输的交通要道等区域。以南丹矿区为中心,尽量选择重金属污染比较严重的区域进行野外调研和样品采集。

2019年10月中旬至2020年5月下旬,先后多次到河池有色金属矿区、冶炼厂及土壤重金属异常区周围进行调研采样。选择长势比较一致的植株,每种乡土树种均采集3株以上不同植株的根际土壤样品和叶片样品。为了更好地说明不同重金属胁迫对植物根际土壤微生物多样性的影响,同时采集非矿区相应乡土树种的根际土壤样品和叶片样品作为对照。

土壤样品采集时,按梅花形采样法采集相应植株树冠垂直投影范围内0~20cm的根际土,用四分法取样,一部分土壤样品存于灭菌的塑料自封袋中,低温保存,尽快带回实验室,并放入−86℃超低温冰冻箱中保存,用于土壤微生物DNA序列测定及微生物多样性分析;另一部分土壤样品经自然风干、研磨过筛后,密封于塑料封口袋中,供土壤理化性质及重金属含量的测定。

采集叶片样品时,尽量采集不同部位的正常叶片,保持叶片完整,同时做好相应的采样记录。将叶片样品带回实验室后,及时用清水和去离子水洗涤,超声洗净后,置于105℃的电热鼓风恒温干燥箱中杀青30min,再将温度调至60℃烘干,研磨粉碎,过100尼龙筛,装入塑料封口袋中,阴凉干燥处保存,备用。

水分含量测定用重量法,土壤全氮测定用半微量凯氏法,土壤全磷测定用NaOH熔融—钼锑抗比色法,土壤全钾的测定用NaOH熔融—火焰光度法。土壤样品和叶片样品重金属含量的测定,用湿法消解,电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)进行。利用FastkitDNA试剂盒提取根际土壤总DNA,储存于−20℃冰箱中保存备用。扩增16SrRNA基因的V3-V4区域,并送至MiSeq测序平台测序。

通过实验数据及分析讨论,可以初步得到以下结论:1)根际土壤微生物对植物吸收重金属具有重要的调控作用。2)乡土树种枫香、银杏、紫玉兰、国槐对重金属元素Mn、Zn、As、Pb有较强耐性,之所以能在重金属含量较高的土壤环境中正常生长,与其根际土壤细菌群落结构多样性密切相关。3)重金属对不同乡土树种根际土壤细菌群落具有较大的影响,其中,KQ组变形菌门、绿弯菌门、硝化螺旋菌门、芽单胞菌门的丰度明显高于FKQ组;在属水平上,矿区乡土树种(KQ组)根际土壤特征微生物为硝化螺菌属与根瘤菌属,能通过改变土壤中的氮环境,提高植物代谢能力,从而强化植物对重金属的耐性。


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